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羊棘球蚴(包虫)病间接ELISA抗体检测试剂盒

羊棘球蚴(包虫)病间接ELISA检测试剂盒 IndirectELISAKitForHydatidDisease使用说明书 【简  介】  试剂盒由抗原包被板、血清稀释板、酶标二抗及其它试剂制成,利用间接ELISA方法检测羊类血清中存在的棘球蚴特异性抗体,从而推断羊类是否患有细粒棘球蚴(包虫)病。【用  途】  适用于羊棘球蚴(包虫)病的血清学诊断。【原  理】  本试剂盒利用棘球蚴三种主要特异性抗原组成的混合抗原包被微孔板。在试验中,若待测血清样品中含有相应的抗体,则将与检测板上抗原结合,形成抗原-抗体复合物。之后加入的酶标二抗将与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合,并可使TMB底物溶液形成蓝色产物。显色反应经终止液终止后呈黄色,最终通过测定450nm波长下吸光度得到结果。【试剂盒主要成分】 1 抗原包被板                  2块                            96孔/块2 阴性对照血清   1管                            50μl /管3 阳性对照血清    1管                            50μl /管4 酶标二抗   2管                           0.2ml/管5 25倍浓缩洗涤液     1瓶                            25ml/瓶6 底物溶液A          1瓶                            10ml/瓶7 底物溶液B         1瓶                            10ml/瓶8 终止液            1瓶                            10ml/瓶9 样品稀释液    2瓶                            30ml/瓶10血清稀释板      2块                            96孔/块11说明书               1张【样品制备】取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。【试剂配制】使用前,试剂盒内除酶标二抗外的各种试剂都应恢复到室温(25˚C左右)。25倍浓缩的洗涤液恢复至室温或略微加热后摇动使沉淀的盐溶解,然后用去离子水作25倍稀释,稀释好的洗涤液在2~8˚C可以存放7天。酶标二抗在使用前用样品稀释液按1:100倍稀释,现配现用。【样品稀释】  标准样品与待检样品均在血清稀释板中按1:40倍的体积稀释(推荐稀释方法:195µL样品稀释液中加5µL待检血清样品)。【操作步骤】 1、取抗原包被板,分别将稀释好的待检样品和对照样品各取100µL加入到抗原包被板孔中,阴性对照和阳性对照各设2孔,置37˚C温育30分钟。2、甩掉板中的溶液,每孔加入稀释好的洗涤液200µL,静置1分钟倒掉,再在吸水纸上拍干,共洗3次。3、每孔加入稀释好的酶标二抗100µL,置37˚C温育30分钟。4、甩掉板中的溶液,每孔加入稀释好的洗涤液200µL,静置1分钟倒掉,再在吸水纸上拍干,共洗3次。5、每孔加入等体积混合好的底物溶液A与底物溶液B100µL,避光显色10分钟。6、每孔加终止液50µL,10分钟内测定450nm波长吸光度。【结果判定】   参考农业部关于印发《2013年国家动物疫病强制免疫计划》的通知,被检抗体正向间接血凝实验抗体效价≥25为阳性。根据该通知制定结果判定标准: 1实验结果同时满足下列条件,方为有效:标准阳性对照孔平均OD450nm≥0.6±0.02。标准阴性对照孔平均OD450nm≤0.3±0.02。2细粒棘球蚴(包虫)病血清学检验结果判定标准:样品OD450nm≤0.3,判为阴性,样品暂未患有细粒棘球蚴(包虫)病。样品OD450nm介于0.3与0.6之间,判为弱阳性,对应样品处于细粒棘球蚴感染初期,尚未形成包囊或包囊不明显。样品OD450nm≥0.6,判为阳性,对应样品应处于细粒棘球蚴感染后期,并形成较明显的包囊。样品OD450nm处于0.3±0.02或者0.6±0.02两个临界值范围内,建议重复检测,以确保结果准确。 【注意事项】1 样品OD450nm≥0.6时有可能是接触大量抗原导致,而非患有包虫病,请确认样品未经抗原免疫。2 本底过高可导致结果整体水平偏高,实验过程需保证二抗清洗干净。3 环境温度低于15˚C可导致结果整体水平偏低,实验过程需保证环境温度尽量接近25˚C,或适当延长底物液显色时间。4 底物液A和底物液B不要暴露于强光,避免接触氧化剂。 5 浓缩洗涤液用去离子水稀释,如果发现有结晶,应水浴加热使其溶解。6  酶标二抗应现配现用。7 4˚C过夜孵育样品及酶标二抗可以获得更好的结果。 【贮 存】 2~8˚C避光保存 【有效期】 9个月【生产企业】 澳门威斯尼斯wns675入口【地 址】 重庆市荣昌县昌元镇昌州大道东段板桥四支路3-03    【邮 编】 402460【技术服务】 023-85261707         【销售热线】 023-85261703(传真)

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羊棘球蚴(包虫)病间接ELISA检测试剂盒  Indirect ELISA Kit For Hydatid Disease
使用说明书
 
【简    介】
  试剂盒由抗原包被板、血清稀释板、酶标二抗及其它试剂制成,利用间接ELISA方法检测羊类血清中存
在的棘球蚴特异性抗体,从而推断羊类是否患有细粒棘球蚴(包虫)病。
【用    途】
  适用于羊棘球蚴(包虫)病的血清学诊断。
【原    理】
  本试剂盒利用棘球蚴三种主要特异性抗原组成的混合抗原包被微孔板。在试验中,若待测血清样品中含有相应的抗体,则将与检测板上抗原结合,形成抗原-抗体复合物。之后加入的酶标二抗将与检测板上抗原抗体复合物发生特异性结合,并可使TMB底物溶液形成蓝色产物。显色反应经终止液终止后呈黄色,最终通过测定450nm波长下吸光度得到结果。
【试剂盒主要成分】 

抗原包被板                  

2                            96孔/

阴性对照血清   

1                            50μl /管

阳性对照血清    

1                            50μl /管

酶标二抗   

2管                            0.2ml/

5 25倍浓缩洗涤液     

1                            25ml/瓶

底物液A          

1                            10ml/瓶

底物液B         

1                            10ml/瓶

终止液            

1                            10ml/瓶

样品稀释液    

2                            30ml/瓶

10血清稀释板      

2                            96孔/

11说明书               

1

【样品制备】
取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。
【试剂配制】
使用前,试剂盒内除酶标二抗外的各种试剂都应恢复到室温(25˚C左右)。25倍浓缩的洗涤液恢复至室温或略微加热后摇动使沉淀的盐溶解,然后用去离子水作25倍稀释,稀释好的洗涤液在2~8˚C可以存放7天。酶标二抗在使用前用样品稀释液按1:100倍稀释,现配现用。
【样品稀释】
    标准样品与待检样品均在血清稀释板中按1:40倍的体积稀释(推荐稀释方法:195µL样品稀释液中加5µL待检血清样品)。
【操作步骤】 
1、取抗原包被板,分别将稀释好的待检样品和对照样品各取100µL加入到抗原包被板孔中,阴性对照和阳性对照各设2孔,置37˚C温育30分钟。
2、甩掉板中的溶液,每孔加入稀释好的洗涤液200µL,静置1分钟倒掉,再在吸水纸上拍干,共洗3次。
3、每孔加入稀释好的酶标二抗100µL,置37˚C温育30分钟。
4、甩掉板中的溶液,每孔加入稀释好的洗涤液200µL,静置1分钟倒掉,再在吸水纸上拍干,共洗3次。
5、每孔加入等体积混合好的底物溶液A 与底物溶液B 100µL,避光显色10分钟。
6、每孔加终止液50µL,10分钟内测定450nm波长吸光度。
【结果判定】  
  参考农业部关于印发《2013年国家动物疫病强制免疫计划》的通知,被检抗体正向间接血凝实验抗体效价≥25为阳性。根据该通知制定结果判定标准:
 
1 实验结果同时满足下列条件,方为有效:
标准阳性对照孔平均OD450nm≥0.6±0.02。
标准阴性对照孔平均OD450nm≤0.3±0.02。
2 细粒棘球蚴(包虫)病血清学检验结果判定标准:
样品OD450nm≤0.3,判为阴性,样品暂未患有细粒棘球蚴(包虫)病。
样品OD450nm介于0.3与0.6之间,判为弱阳性,对应样品处于细粒棘球蚴感染初期,尚未形成包囊或包囊不明显。
样品OD450nm≥0.6,判为阳性,对应样品应处于细粒棘球蚴感染后期,并形成较明显的包囊。
样品OD450nm处于0.3±0.02或者0.6±0.02两个临界值范围内,建议重复检测,以确保结果准确。
 
【注意事项】
1  样品OD450nm≥0.6时有可能是接触大量抗原导致,而非患有包虫病,请确认样品未经抗原免疫。
2  本底过高可导致结果整体水平偏高,实验过程需保证二抗清洗干净。
3  环境温度低于15˚C可导致结果整体水平偏低,实验过程需保证环境温度尽量接近25˚C,或适当延长底物液显色时间。
4  底物液A和底物液B不要暴露于强光,避免接触氧化剂。 
5  浓缩洗涤液用去离子水稀释,如果发现有结晶,应水浴加热使其溶解。
6   酶标二抗应现配现用。
7  4˚C过夜孵育样品及酶标二抗可以获得更好的结果。
 
【贮  存】  2~8˚C避光保存 
【有 效 期】  9个月
【生产企业】  澳门威斯尼斯wns675入口
【地  址】  重庆市荣昌县昌元镇昌州大道东段板桥四支路3-03      
【邮  编】  402460
【技术服务】  023-85261707                
【销售热线】  023-85261703(传真)

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